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 circRNA服務

circRNA服務?
circRNA RIP實驗
來源: | 作者:geneseed | 發布時間: 2017-09-03 | 15126 次瀏覽 | 分享到:

RNA免疫沉淀RIP運用針對目標蛋白質的抗體把相應的RNA-蛋白質復合物沉淀下來,經過分離純化并對結合在復合物上的RNA進行測序或PCR分析。RIP可應用于研究miRNA調節靶點、RNARNPRNA結合蛋白)的互作關系等。


 

實驗流程:
1.細胞裂解
2.捕獲RNA-蛋白復合物
3.洗脫
4.檢測


實驗實例:

       以anti-SNRNP70為目的抗體,anti-IgG為對照抗體,在Hela細胞裂解樣本中,進行免疫沉淀。免疫沉淀所得蛋白質樣品,進行Western blot檢測,input樣本與目的樣本在約70KDa大小位置有明顯條帶,陰性對照樣本無條帶。

       免疫沉淀所得RNAU1 snRNA特異性引物,進行RT-PCR分析,input樣本與目的樣本可見明顯的PCR產物,指示SNRNP70富集U1 snRNA


Western blot檢測:

     

RNA 檢測:

 

 

電泳跑膠圖:

 


 

PCR檢測結果



 

 

 


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